Анализ ПЦР — что это такое. Расшифровка и цена

Суть метода полимеразной цепной реакции

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

  • гепатит C, B;
  • уреаплазмоз половых органов;
  • ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
  • хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
  • микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
  • бактериальный вагиноз;
  • кандидоз половых органов;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • туберкулез;
  • сальмонеллез;
  • туберкулез (легочные и внелегочные формы);
  • листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
  • цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную  инфекцию;
  • детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
  • ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих.

https://www.youtube.com/watch?v=ytaboutru

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Анализ ПЦР - что это такое. Расшифровка и цена

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

  • Универсальность. Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
  • Специфичность. ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
  • Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
  • Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
  • Возможность проведения количественного анализа. Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида  в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 — 104 КОЕ/тамп. – нет.

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Пцр-диагностика: что это такое

Правила довольно просты:

  • Мазок или соскоб из половых путей, как у мужчин, так и у женщин, сдается после 72-часового воздержания от сексуальных контактов, непосредственно перед забором нужно произвести туалет интимной зоны и 2-3 часа не мочиться. Прекрасной половине человечества не следует планировать визит в лабораторию во время менструации и сразу после нее, кроме того, запрещено использовать какие-либо средства, нарушающие естественное состояние микрофлоры влагалища (спринцевания, свечи). Всем пациентам необходимо завершить антибактериальную терапию (если таковая проводилась) не позднее, чем за 2 недели до ПЦР-анализа;

  • Кровь сдается из вены утром натощак;

  • Мочу и сперму собирают в маленькие стерильные контейнеры, которые можно приобрести в аптеке, если процедура забора будет производиться дома. Но не забывайте о сроках хранения и транспортировки биоматериалов – максимум 2 часа;

  • Слюну собирают после 3 часов воздержания от приема пищи и напитков, допустимо только полоскать рот водой. Непосредственно перед забором рекомендуется помассировать область слюнных желез.

  • Прочие, редко используемые виды биоматериалов собирают только в клинике, где вам и предоставят все необходимые пояснения относительно подготовки.

Анализ пцр относительно молодой, ему около 30-ти лет. Данная методика исследования прошла все этапы эволюции и сегодня является одной из самых информативных. Смысл заключается в многократном увеличении ДНК искусственным образом. Осуществляется повторение той части, которая имеется лишь у определенной разновидности патогенного возбудителя.

Время воздействия составляет три минуты. Достаточно около тридцати таких этапов, чтобы вышло нужное число молекул для четкого выявления агента способом электрофореза.

Кроме этого медики сращивают части ДНК, выполняют различные мутации, что позволяет применять анализ пцр диагностику не только с целью выявления инфекционных и генетических нарушений, но и для подтверждения или опровержения родственных связей, клонирования и прочее.

Проведение пцр анализа осуществляется в специальных медицинских учреждениях с применением специализированной техники.

Результаты ПЦР-анализа

Значения могут носить отрицательный либо положительный характер. В первом случае можно говорить о том, что никаких инфекций и патологий не выявлено, во втором, они обнаружены и человек заражен.

Часто позитивный результат наблюдается у носителей инфекций, но при этом люди себя абсолютно нормально чувствуют, ни на что не жалуются. Нужно отметить, что это ранняя стадия болезни, которая пока себя не проявила, нужна консультация доктора. Когда недуг был обнаружен, нужно обязательно предпринять терапевтические меры.

https://www.youtube.com/watch?v=ytadvertiseru

Пцр диагностика инфекций выступает на сегодняшний день самым точным исследованием и позволяет безошибочно определить наличие вредителя.

Выше мы упоминали о качественной и количественной ПЦР-диагностике, так вот, в первом случае расшифровка результатов не представляет никакой трудности: ответ либо положительный, либо отрицательный. И если условия подготовки, сбора биоматериала, проведения анализа и оценки итогов не были нарушены, то нет и причин сомневаться в достоверности полученных данных.

По-другому дело обстоит в случае с ПЦР количественной. Ее результатом является число, демонстрирующее вирусную нагрузку. Измеряется виремия в МЕ/мл или в копиях/мл, при этом в одной МЕ (международной единице) содержится примерно 4 копии вируса (точную цифру нужно узнавать в лаборатории, проводившей анализ, поскольку оборудование у всех разное).

В некоторых клиниках для большей компактности результатов количественного анализа ПЦР используют записи следующего вида: 3?104 МЕ/мл, 4?110 МЕ/мл, 5?105 МЕ/мл и так далее. Чтобы понять, о какой цифре идет речь, достаточно произвести умножение.

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

  • Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
  • Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
  • Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl Enter

Как сдать анализ ПЦР правильно: подготовка

Все зависит от разновидности изучаемого материала. Анализ крови пцр сдается в утреннее время на голодный желудок. Анализ кала на пцр и мочи сдается аналогично, материал берут чистыми приспособлениями и кладут в стерильный контейнер. Если нужно исследовать мазок либо соскоб, тогда следует исключить половую связь за несколько суток до мероприятия, в том числе и спринцевания. Воздержитесь от сдачи анализа в период месячных и еще на протяжении двух дней после их окончания.

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

  • Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
  • Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
  • С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

При выборе типа биоматериала для диагностики врачи ориентируются на специфику инфекции, на ее излюбленную локализацию. Ведь от того, попадет ли вредоносная ДНК в пробу, зависит то, будет ли получен достоверный результат анализа.

Для ПЦР берутся следующие материалы:

  • Мазок или эпителиальный соскоб со слизистых оболочек. Это может быть уретра, влагалище, шейка матки, цервикальный канал, анальное отверстие, ротовая, носовая и даже глазная полость. Мазки наиболее актуальны при диагностике заболеваний, передающихся половым путем. Для взятия мазка или соскоба используются зонды с разными наконечниками;

  • Кровь из вены берут, когда нужно обнаружить ВИЧ, гепатит, цитомегаловирус, мононуклеоз или какое-либо заболевание бактериальной этиологии, например, сифилис, холеру или боррелиоз;

  • Биологические жидкости (моча, слюна, сперма, мокрота, секрет предстательной железы, желудочный сок, плевральная, суставная, спинномозговая или амниотическая жидкость, а также бронхоальвеолярный лаваж) берутся по показаниям. Например, ПЦР-анализ мокроты используется при диагностике туберкулеза;

  • Пунктаты и биоптаты органов и тканей, как правило, берутся при подозрении на онкологию. Исключение составляет биопсия желудка, которую проводят для определения наличия Helicobacter pylori – бактерии, вызывающей гастрит и язвенную болезнь.

Пробы подлежат отправке в амплификатор не позднее, чем через 2 часа после забора, если они находятся в помещении при комнатной температуре. Когда ПЦР-анализ нужно по какой-то причине отложить, пробирки с биоматериалами допустимо оставить в холодильнике на одни сутки при температуре 2 – 8°С. Максимальный срок хранения – 14 дней, но тогда пробы подвергаются глубокой заморозке (-20°С). После оттаивания они должны быть сразу использованы, повторное замораживание запрещено.

Цены сильно разнятся в зависимости от региона и типа клиники. Дешевле обследоваться в государственном медучреждении, комфортнее и быстрее – в частном диагностическом центре, все логично.

https://www.youtube.com/watch?v=ytdevru

Стоимость качественного ПЦР-анализа на наличие основных ЗППП (хламидиоза, гонореи, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомониаза), герпеса, гепатита и папилломовируса разных типов, ВИЧ, цитомегаловируса, хеликобактерии и т. д. составляет в среднем от 250 до 600 рублей за каждого конкретного возбудителя.

Количественный анализ почти всегда стоит дороже, чем качественный, а в случае с ВИЧ и гепатитом – значительно дороже. Например, больные гепатитом москвичи могут узнать свою вирусную нагрузку за 3500-6000 рублей, ВИЧ-инфицированные – за 11000-13000 рублей.

Автор статьи:Мочалов Павел Александрович | д. м. н. врач-терапевт

Образование: Московский медицинский институт им. И. М. Сеченова, специальность — «Лечебное дело» в 1991 году, в 1993 году «Профессиональные болезни», в 1996 году «Терапия».

Другие врачи

13 научных фактов, как продлить жизнь!

5 самых эффективных домашних рецепта для волос!

Проведение анализа пцр

Выполняется данное исследование в лабораторных условиях. Мероприятие состоит из нескольких этапов:

  1. Забор материала выполняется в кабинете медицинского учреждения. Все оборудование и принадлежности должны быть стерильными.
  2. Материал хранится под определенной температурой, не дольше двух часов по времени. При более продолжительном сбережении пробирка помещается в холодильник. Если нужно сохранить материал на две недели, тогда его замораживают. Перевозится в специально отведенных для этой цели контейнерах.
  3. Выделение ДНК. Все зависит от типа интересующего представителя патогенной флоры. Применяются методики твердофазной сорбции и др.
  4. Материал помещают в специальную центрифугу. Автоматически делается амплификация. Длится манипуляция от двух до трех часов. Число циклов колеблется от 30 до 40-ка.
  5. Фиксирование полученных данных. Фрагменты выделяются способом электрофореза. Образцы изучаются в ультрафиолетовом свечении. Появление оранжевой полосы говорит о позитивном результате.
  6. Трактовка полученных данных. Бывает положительной и отрицательной, количество интерпретирует доктор. На его основании делают выводы о прогрессировании болезни, и определяется тактика лечения.

Мазок у женщин

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища. При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

  • За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
  • За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
  • За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
  • Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
  • За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

  • За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
  • Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
  • Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
  • Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Мазок у мужчин чаще всего берут из мочеиспускательного канала. Необходимо его сдать в случае подозрения на наличие инфекций, заболеваний с вялотекущей клиникой, а также в случае обнаружения патологий у партнерши.

Предпосылками для назначения данного исследования служат:

  • наличие выделений;
  • болезненные ощущения при мочеиспускании;
  • покраснения и отеки;
  • сыпь;
  • постоянные позывы в туалет;
  • воспаления мочеполовой сферы;
  • подозрения на любые зппп;
  • проблемы с репродуктивной функцией;
  • профилактика.

Сдают такой анализ по рекомендации доктора.

Где и для чего используется

Анализ ПЦР - что это такое. Расшифровка и цена

Анализ днк методом пцр применяется в самых разных сферах. Сегодня это один из самых популярных диагностических способов, который является приоритетным:

  • в гинекологии. Позволяет определить ряд инфекций: ВПЧ, хламидиоз, гарднереллы и многое другое. Обнаружение вирусов и инфекций позволяет предпринять своевременно меры по предотвращению рака шейки матки;
  • в неонатологии. Известно множество патологий, которые способны вредить плоду еще в материнской утробе;
  • в службе крови. Пациенты с тяжелыми диагнозами типа сифилиса, ВИЧ и др., проходят пцр диагностику. Она определяет даже скрытые инфекции, которые невозможно выявить с помощью обычных серологических методов;
  • при подозрении инфекций, также делается пцр анализ на зппп. С помощью него удается выявить вирусы гепатита, нередко назначают делать анализ пцр на вич и другие инфекции;
  • в пульмонологии назначается при подозрении на воспаление легких, наличие бронхитов. Делается также анализ крови пцр на туберкулез, что позволяет определить недуг на начальном этапе развития.

В мед учреждениях обычно предлагается комплексный пцр анализ для определения целых групп инфекций.

Анализ крови

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

  • Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
  • Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
  • Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
  • Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
  • Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Как проводится тест ПЦР?

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

  • Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
  • Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
  • Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
  • Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
  • Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
  • Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
    соскобы и мазки со слизистых  для диагностики ЗППП;
    клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других. Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.

https://www.youtube.com/watch?v=ytpressru

ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

  • Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
  • Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

https://www.youtube.com/watch?v=upload

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
DoctorJohn Blog
Adblock detector